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2005年8月17日 作者:sales [返回]
良种金银花的组培快繁技术研究

良种金银花的组培快繁技术研究

李景刚,孙满芝

(平邑县林业局,273300)

摘要:利用金银花良种PM-1的嫩枝梢作为外植体,进行离体培养,研究出其生长分化的基本培养基为MS, 最佳分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+MAA0.1mg/L,分化率为93%,最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.3mg/L,生根率96%。

关键词:金银花  组培  愈伤组织  分化率  生根率

中图分类号:S567.1    文献标识码:A

良种金银花PM-1是用当地金银花用秋水仙碱处理而得,其成熟花蕊千针鲜重310g,是平邑大毛花(120.4g)的近26倍,是鸡爪(94g)的近3倍;大部分金银花的裸芽为徒长枝,而PM-1的裸芽为花枝、长25㎝~50㎝;PM-1耐大肥大水,一般无徒长枝。PM-1墩形紧凑,枝条便于采摘。但用常规无性繁殖速度慢,不能满足市场需要,因此进行组培快繁试验,现总结如下。

1 试验材料与方法

11 试验材料

取金银花良种PM-1的嫩枝梢用清水冲洗干净,剪成l㎝~2㎝的小段,在无菌室用紫外线照射20min后,用75%的酒精处理30s,无菌水冲洗一次,再用0.1%的升汞处理6min,无菌水冲洗4次,最后接种到培养基上。

12 试验设计

将外植体接种到4种基本培养基(WHWPMMSN6)上,按随机区组试验。设置4次重复,每重复50瓶,筛选出芽萌动率高且产生愈伤组织较快的的培养基。

在所选基本培养基中加入不同浓度6-BANAA,将上述愈伤组织接种到不同激素浓度的培养基中,观察不定芽的分化情况,选出分化率较高的激素配比。

将丛生芽切移到NAA不同浓度的生根培养中,观察不定根的形成过程,选出最佳生根培养基。

13 培养条件

培养基pH值为5.8,以琼脂为固定剂,加蔗糖3%,接种材料置于两支40W的日光灯下,光照时间为1012h,室内温度控制在24℃~28之间。

2 结果与分析

21 基本培养基对处植体愈伤组织形成的影响

选择的WHWPMMSN64种基本培养基,加入6-BA2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,经培养观察结果(1)表明在MS培养基中愈伤组织产生较快,只需18天,且芽萌动率较高。达70%。


             

 

22 生长素与分裂素配比对丛生芽分化的影响

采用基本培养基为MS附加6-BANAA4种不同浓度进行正交试验,培养25天后观察丛生芽分化情况,见表2



从表2可看出,愈伤组织分化丛生芽频率以10ll号试验效果最好。即适宜的分裂素6-BA浓度为2.0 mg/L,生长素NAA浓度为0.10.15 mg/L,最佳分化培养基为:MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,分化率为93%,平均丛生芽数为9个。

23 生长素对丛生芽诱导生根的影响

待丛生芽生长至2㎝高时,切移到l/2MSNAA浓度为0.10.51.01.52.02.53.03.54.04.5mg/L,生根培养基中,诱导不定根,进行生根培养。观察其生根情况,结果如表3

                              

从表3看出,在1/2MS基本培养基条件下,诱导丛生芽生根的NAA最适宜浓度为30mg/L,生根率为96%,不定根条数达7根。

24 继代培养对繁殖系数的影响

丛生芽分化均采用继代培养方式进行,但随着培养代数的增加,愈伤组织形成与分化的主要指标,如形成幼苗天数,平均丛生芽数,分化率,苗高均表现不同的特点,本试验用MS附加6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L为分化培养基,继代培养的结果如表4

              

从表4可以看出,在继代培养中,分化率随着代数的增加而增加,至45代时,达到96%,5代以后分化率逐渐下降,但不很明显;幼苗形成的天数差异较大,初代培养最长达25天,随着代数的增加,其形成的天数越来越短;平均丛生芽数的差异也较大,培养初期,丛生芽数较少,为5个,至第4代时,丛生芽数最多为9个,从第6代开始又逐渐减少,继代培养对丛生芽的高度影响不大。

3 结论与讨论

31 试验表明,外植体萌动率较高,愈伤组织形成较快的基本培养基为MS,最佳分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,分化率达93%,最佳生根培养其为1/2MS+NAA3.0mg/L,生根率达96%。

32 PM-1金银花随着继代培养代数的增加,平均丛生芽数和分化率也增高,至第4代时达到最高,此时的繁殖系数最大,以后随代数增加而繁殖系数减小。

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